优秀论文

HPLC-ELSD测定康艾注射液中黄芪甲苷的含量

张春辉  杨  晓  奚  玮

(青岛市药品检验所)

康艾注射液是由黄芪、人参、苦参素等中药组成的复方制剂，具有益气扶正，增强机体免疫功能。用于原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤；各种原因引起的白细胞低下及减少症。慢性乙型肝炎的治疗。黄芪甲苷为方中君药黄芪的主要有效成分，我们采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定康艾注射液中黄芪甲苷的含量，控制其质量。

1. 仪器与试药

LC-20A高效液相色谱仪（日本，岛津）；Alltech 2000 ELSD检测器；乙腈为色谱用试剂，其它试剂均为分析纯；黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所 批号：110781-200613）；康艾注射液（青岛国风药业股份有限公司  批号为：041102，050305，050601）。

2. 色谱条件

色谱柱：Platisil(铂金) ODS C18，5μm，250×4.6mm；流动相：乙腈—水（32∶68）；柱温：40℃；流速：1.0ml·min^-1；ELSD检测器条件：漂移管温度为105℃，气体（空气）流速为2.6ml·min-1；理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。

3. 线性关系考察

精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含黄芪甲苷1.0705mg的溶液，分别精密量取2、4、6、8、10ml至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，稀释成浓度为0.2141，0.4282，0.6423，0.8564，1.0705mg·mL-1的溶液，分别精密吸取20μl，注入高效液相色谱仪，依法测定，以黄芪甲苷峰面积常用对数值为纵坐标Y，浓度常用对数值为横坐标X，绘制标准曲线，结果表明黄芪甲苷在4.282～21.410μg之间呈良好的线性关系。回归方程： LgA=1.71437LgC+6.86058  Υ=0.9995 。

4. 对照品溶液的制备

    取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

5. 供试品溶液的制备

精密量取康艾注射液20ml，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

6. 阴性对照溶液的制备

按质量标准中处方比例制成缺黄芪的样品，按照供试品制备方法制备阴性对照溶液，依法测定。结果表明，本方法中其它成分对黄芪甲苷的测定无干扰。

7. 精密度试验 

精密吸取黄芪甲苷对照品溶液(0.4282mg·mL^-1)，测定黄芪甲苷峰面积积分值的平均值为1768819.2，其RSD=1.07%。

8. 稳定性试验

精密吸取供试品（批号：091125）溶液，在相同的色谱条件下于0，1，12，24，48，72h进行测定，测得黄芪甲苷峰面积积分值的平均值为945069.3，其RSD=1.92%（n=6）。结果表明，本方法的供试品溶液在3天内稳定。

9. 重复性试验

精密称取供试品（批号：091125）共六份，依法测定黄芪甲苷含量，测得六份含量平均值为0.074mg/ml，RSD=1.01%（n=6）。说明此方法重复性较好。

10. 回收率试验

采用加样回收法，精密量取已知含量的康艾注射液（批号：091125）5ml，10ml，15ml，分别精密加入浓度为0.8927mg/ml的黄芪甲苷对照品溶液1.5ml，1ml，0.5ml，按供试品溶液的制备方法及上述色谱条件进行测定，计算回收率。

11. 样品的含量测定

取三批样品装量差异项下的内容物，依法测定。

12. 讨论：

黄芪甲苷紫外吸收较差，目前多用薄层色谱法测定其含量，方法重现性差，测定结果不准确。采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定康艾注射液中黄芪甲苷的含量，可以有效的排除溶剂的干扰，该方法重现性、准确度、灵敏度准确度均能符合含量测定的要求，是一种检测黄芪甲苷的有效方法。

（参考文献、图、表略）