葡萄酒前处理及高效液相色谱法同时测定
来源： 发布时间：2011-2-18葡萄酒前处理及高效液相色谱法同时测定
其中的安赛蜜和糖精钠
刘 琳1，2 牟志春1 郝鹏飞1
（1山东检验检疫局技术中心；2 中国海洋大学）
葡萄酒含有大量的人体不可缺少的糖类、有机酸、 氨基酸、维生素等营养成分，然而这些营养成分对添加剂的检测造成了一定的干扰。在测定过程中，准确的提取待测组分，降低背景干扰，避免干扰物质对基线造成影响，找到一种简单有效的前处理方法就尤为重要了。本文采用了过中性氧化铝柱的方法，有效地降低了干扰物质对基线的影响，用反相高效液相色谱法分离和测定了葡萄酒中的安赛蜜和糖精钠。该方法简便、快速、重现性好。
1 实验部分
1.1 色谱条件 色谱柱 Waters Xbridge shield RP18（4.6×
1.2 样品前处理 取
2 结果与讨论
2.1前处理方法的选择 葡萄酒中含有的物质复杂，干扰物质对基线造成影响明显，5分钟之前尤其显著，而安赛蜜，糖精钠等的出峰较早，这种干扰很难在测定中对安赛蜜进行分离和定量，导致回收效果不理想，所以就要选择合适的前处理方法。(1)添加沉淀剂 使基线干扰物减少，保护色谱柱不被有色物质长期污染，保持柱效。(2) 中性氧化铝柱的选择 中性氧化铝柱适用于醛、醌、酮、某些苷及酸碱溶液中不稳定的化合物如酯的分离。葡萄酒中含有大量的糖类、有机酸、氨基酸、维生素等营养成分，这些营养成分大多属于醛、醌、酮类，所以中性氧化铝可以有效地除去此类物质，对降低背景干扰具有决定性的意义(见图1、2) 。(3) pH的调节 葡萄酒的pH一般在3-4左右，中性氧化铝pH值为7.5，用于分离中性物质，应用效果最好，所以调节样品pH7.0-8.0,可以有效地增强除干扰的效果，对有色物质和浸出物的沉淀有显而易见的帮助，效果明显。(4)样品收集的选择 安赛蜜和糖精钠都是极易溶于水的物质，在过滤的过程中目标物是否流失对回收率很重要。实验中尝试了过滤后收集滤液；过滤后滤液弃去，用5.0mL流动相洗脱，收集洗脱液；过滤后收集滤液和收集洗脱液这三种方法。结果显示，一法和三法回收率>84%，回收效果相似，二法回收率<5%。由此看出，目标物在过滤时已基本滤出，可以省略洗脱这一步骤（见图3、4）。
糖精钠 安赛蜜 糖精钠 安赛蜜
图1 没过柱样品图 图2 过柱后样品图 图3 样品过滤后收集滤液图 图4样品洗脱液谱图
2.2方法回收率和精密度 在干白葡萄酒，干红葡萄酒，冰酒，蓝莓酒中加入标准液，按样品处理的方法进行处理，按上述色谱条件测定，添加标准的回收率安赛蜜为84.0 %-91.7%,糖精钠为87.5%-95.5%之间，方法的RSD%安赛蜜为 0.63,糖精钠为0.32。
3 讨论 上述条件下，各种葡萄酒两次测定结果的绝对值不超过算术平均值的10%，回收率高，精密度好，此方法操作方便，前处理简便，适用性好，效果好，有效去除干扰物质对基线造成的影响，使安赛蜜和糖精钠得到有效地分离和定量，更好的保护了色谱柱。
（参考文献、图、表略）