优秀论文

 

马粪海胆高效液相色谱指纹图谱研究

陈军辉¹ 赵恒强¹ 王虹¹ 杨佰娟¹ 臧家业¹ 王小如^1,2

（¹国家海洋局第一海洋研究所；²厦门大学化学化工学院）

海胆作为一种重要的海洋药物资源，目前仍缺乏相应的真伪鉴别和质量控制方法，中药指纹图谱技术已成为国内外公认的鉴别陆地中草药以及评价中药质量的最有效手段，目前，已广泛应用于陆源中药的真伪鉴别和质量控制。本文应用高效液相色谱法（HPLC）建立马粪海胆的HPLC指纹图谱，为海胆药材的鉴别及质量控制提供新方法。

本文对提取溶剂、提取方式、提取温度等因素进行了优化，结果发现以乙酸乙酯为提取溶剂，采用水浴回流提取，提取温度为50℃时海胆化学成分提取效率最高。反相色谱技术常用于天然产物有效成分的分离和测定，本文采用反相C₁₈色谱柱用于海胆指纹图谱研究，结果表明，使用C₁₈色谱柱获得的色谱指纹图谱各峰分离度高，色谱峰分布均匀，峰型好看，谱图信息量大，特征性强，具有较好的代表性。本文考察了检测波长对指纹图谱的影响，选择210 nm作为海胆HPLC指纹图谱研究的检测波长。本文对甲醇和乙腈做流动相B时对分离度的影响进行了考察，对不同浓度的冰醋酸、甲酸和磷酸水溶液做流动相A时对分离的影响进行了考察。最终选择以乙腈-水为流动相，二元线性梯度洗脱，流速为0.8 mL/min，柱温为室温，检测波长为210 nm，进样量20µL。结果表明，该方法具有较好的精密度、重复性、稳定性。

在本研究建立的分析系统下，建立了马粪海胆样品的HPLC 指纹图谱。10批马粪海胆指纹图谱有12个共有峰，其中特征性明显的主要有4 个色谱峰。本文采用EXCEL 2002 办公软件，采用夹角余弦法计算10批马粪海胆生成对照指纹图谱，并计算各批次海胆药材的指纹图谱与对照指纹图谱之间的相似度。结果表明，本文建立的马粪海胆指纹图谱结合相似度分析，可用于马粪海胆与其它科属海胆的区分，并可用于海胆药材的质量评价以及质量控制。另外，采用本文建立的海胆HPLC 指纹图谱实现了海胆与海狗、小海马、海星等样品的鉴别。

本文所选样品前处理方法简便易操作，在文中给定的色谱条件下，海胆中各类成分分离良好，方法精密度、重复性和稳定性较高。本文建立了基于海胆药材化学成分的HPLC指纹图谱分析方法，根据不同批次海胆的指纹图谱特征，实现了海胆药材的真伪鉴别。

（参考文献及图、表略）