优秀论文

 

益坤丸质量标准的研究

杨晓云

（青岛市药品检验所）

益坤丸是由熟地黄、当归、白芍、柴胡、黄柏、茯苓、白术、 白芷、益母草等四十一味中药组成的复方制剂，具有补气养血，调经散寒，用于气虚血衰引起的月经不调，行经腹痛，宫寒带下，腰酸体倦。本文采用薄层色谱法对其中的川芎、白芍、黄柏、黄芩进行了定性鉴别，鉴别项下的阴性对照无干扰，专属性强。橙皮苷是方药中主要药味陈皮的主要活性成分，本文研究制定了陈皮苷的含量测定方法,作为检测和控制该制剂的含量指标，为该制剂的质量控制提供了可行的方法

1  仪器与试药

    高效液相色谱仪：Agilent1100；甲醇为色谱纯；其他试剂为分析纯；橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110721-200211）；益坤丸（北京同仁堂制药厂生产）。

2  薄层鉴别

2.1为鉴别其主要成分川芎

供试品溶液的制备：取供试品3g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：取川芎对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。

阴性对照溶液的制备：模拟制剂处方比例与工艺，除去川芎，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

薄层层析：照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱无干扰。

2.2为鉴别其主要成分白芍

供试品溶液的制备：取本品3g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照溶液的制备：取白芍对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。再取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性对照溶液的制备：模拟制剂处方比例与工艺，除去白芍，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

薄层层析：照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40：5：10：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱无干扰。

2.3为鉴别其主要成分黄柏

供试品溶液的制备：取本品3g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照溶液的制备：取黄柏对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性对照溶液的制备：模拟处方比例与工艺，除去黄柏，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

薄层层析：照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述三两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丁醇-丙醋酸-水(5：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照色谱无干扰。

2.4鉴别其主要成分黄芩。

供试品溶液的制备：取本品3g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照溶液的制备：取黄芩对照药材0.5g，加甲醇10ml，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性对照溶液的制备：模拟处方比例与工艺，除去黄芩，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

薄层层析：照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-醋酸-水（10：7：5：3）上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱无干扰。

3  含量测定

3.1  对照品溶液的制备：取陈皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中含芍药苷91.4μg。

3.2  供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，剪碎，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

3.3 空白溶液的制备：按处方比例及工艺配制缺陈皮的益坤丸，按供试品溶液的制备方法，制备阴性对照液。依照高效液相色谱法操作，结果表明，益坤丸其他成分对橙皮苷测定无干扰。

3.4 色谱条件

色谱柱： 广州phenomenexC18柱（4.6mm×250mm，4µm）；流动相：甲醇-0.5%醋酸（39∶61）；检测波长：283nm；柱温：40℃；流速：1.0ml·min^-1；进样量：供试品与对照品各10μl；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于3500。

3.5  线性关系的考察：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含90μg的溶液，即得。精密吸取上述溶液2、4、6、8、10μL，注入高效液相色谱仪，依法测定，以橙皮苷峰面积积分值为纵坐标Y，进样量为横坐标X，通过原点进行线性回归，计算得回归方程。回归方程：Y=1489.8x +16.76 相关系数：Υ=0.9998 线性范围：0.0～914.0µg。

3.6　重复性试验：分别取同一批号样品（批号：6013924）六份，按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，依法测定橙皮苷含量，平均值为10.18mg/丸，RSD=1.0%（n=6）。

3.7　稳定性试验：精密吸取橙皮苷对照品溶液，每隔一定时间进样一次，测得橙皮苷峰面积值，RSD=0.56%（n=7），结果表明，橙皮苷的甲醇溶液两天内稳定。

3.9  样品的含量测定：取三批样品重量差异项下的内容物，各两个平行样品，依法测定。

（参考文献、图、表略）